Estudo citológico, anatomopatológico e molecular do papiloma vírus bovino (bpv) no trato reprodutivo de vacas

Abstract

O DNA do papiloma vírus bovino-1 (BPV-1) tem sido constatado em lavado uterino de vacas, evidenciando que o vírus infecta o trato reprodutor feminino, mas estudos necessitam avaliar sua patogenicidade. Investigou-se o BPV e sua associação às lesões no sistema reprodutivo de fêmeas bovinas adultas por meio de diferentes técnicas: macroscopia e histopatologia (coloração hematoxilina e eosina – HE); imunohistoquímica (IHQ) para marcadores oncogênicos p16, Ki-67 e receptor de estrógeno (RE); análise citológica em esfregaço de colo uterino pela técnica Papanicolau; nested-PCR para o gene L1 do capsídeo viral do BPV utilizando os primers FAP59/ FAP64 e Delta Epsilon F/ Delta Epsilon R. Amostras de tecidos de 80 vacas (ovários, tubas, cornos, corpo e cérvix uterino) e sangue total com anticoagulante (EDTA) foram coletadas em abatedouros no Estado de São Paulo. Os materiais para a análise histopatológica foram fixados em formol 10% tamponado; sangue total e tecidos coletados para nested-PCR foram mantidos congelados a -20ºC até realização das análises. Foi colhido suabe de colo uterino para estudo citológico em lâminas de vidro e fixados com polietilenoglicol em spray. A macroscopia mostrou que em 80 animais 5,0% apresentaram metrite e 5,0% endometrite; na histopatologia (HE) 25,0% das vacas apresentaram endometrite inespecífica. A citologia encontrou atipias em 25% (20/80) amostras: cariomegalia, binucleação e multinucleação. A IHQ e nested-PCR foram realizadas a fim de verificar se havia associação entre lesões teciduais e infecção pelo BPV. A nested-PCR e a IHQ p-16 foram negativas em todas as amostras. 20 animais com atipia celular (Papanicolau) foram analisadas em HE confirmando a presença de endometrite inespecífica; a IHQ destes materiais utilizando Ki-67 e RE detectou positividade em 17,5% (14/80) para ambos biomarcadores, identificando adenocarcinoma endometrial. Demonstra-se que o estrógeno foi fator de risco para esta