Prospecção de fungos endofíticos, edáficos e bioformulações para o controle de Sphenophorus levis VAURIE, 1978 (Coleoptera: Curculionidae) na cultura da cana-de-açúcar

Abstract

O objetivo geral deste trabalho foi prospectar fungos endofíticos e edáficos da cana-de-açúcar, desenvolver e testar um novo meio de cultura líquido para Beauveria bassiana (IBCB170) e Metarhizium anisopliae (IBCB383) e realizar testes para controle biológico de Sphenophorus levis. As amostras para a prospecção dos fungos foram coletadas em março e abril de 2022, com origem em três municípios do estado de São Paulo. Foram realizadas duas coletas em cada propriedade, totalizando seis coletas. Em cada coleta, foram selecionadas e retiradas 10 plantas e 10 amostras do solo ao redor de cada uma. Os fungos prospectados foram categorizados conforme a caracterização macroscópica e, após uma seleção prévia, seguiram para identificação molecular em nível de espécie. Para o desenvolvimento de um novo meio de cultura com as cepas IBCB170 e IBCB383, foram realizados dois processos de seleção: um em 2022, com testes de cinco meios, e outro em 2023, com testes de oito meios, utilizando variações nas fontes de carbono e nitrogênio. Em cada meio, foram feitas cinco repetições, inoculadas com 10 mL de suspensão fúngica na concentração de 1×108 blastosporos/mL, mantidas sob agitação a 160 rpm. Amostras de cada repetição foram coletadas em 72 horas e 168 horas, sendo avaliadas quanto à concentração de blastosporos/mL e unidades formadoras de colônia (UFC). O inóculo que apresentou maior concentração de blastosporos/mL foi utilizado para produção em biorreator de bancada. Para as bateladas com os meios da seleção SI-2022 e SII-2023, foram realizados experimentos com variações na quantidade de inóculo em relação ao volume do meio e no tempo de amostragem (72 horas e 168 horas). Nessas condições, foram avaliadas a concentração de blastosporos/mL e a contagem de UFC por plaqueamento. Em campo, o experimento foi realizado na Fazenda Boa Esperança, no município de Sertãozinho, São Paulo. O delineamento experimental foi em blocos casualizados, utilizando blastosporos obtidos com os meios selecionados para IBCB170 e IBCB383 da seleção SI-2022, na concentração de 1×108 /mL, e suspensões contendo conídios aéreos de B. bassiana (IBCB66) e M. anisopliae (IBCB425), na concentração de 1×1013/mL. Tanto para os experimentos de patogenicidade realizados com adultos de S. levis quanto para os experimentos no biorreator, foram aplicados ANOVA e teste de Tukey (p < 0,05). Para os resultados do experimento de campo, foi utilizada ANOVA seguida do teste de Duncan (p < 0,05). Todos os testes foram realizados por meio do software RStudio®. Na prospecção dos fungos endofíticos e edáficos, foi possível o isolamento de 576 fungos e a identificação molecular de 17 morfotipos. Nos experimentos de patogenicidade realizados com S. levis, o morfotipo USARC10C2 apresentou maior média de mortalidade (4,0); para os edáficos, o morfotipo ATSC2C1 teve maior média de mortalidade (5,0 na repetição 1 e 2,2 na repetição 2). Para as seleções dos novos meios de cultura, as maiores médias de blastosporos/mL foram: SI2022 T2 para IBCB170 (5,65) e T4 para IBCB383 (16,15); e SII-2023 T2 para IBCB170 (2,57) e T4 para IBCB383 (1,298). Nos testes em biorreator de bancada, observou-se que a cepa IBCB170 produziu maior concentração de blastosporos/mL do que a cepa IBCB383. Quanto aos resultados de campo, a menor incidência de tocos atacados foi observada no tratamento com blastosporos de M. anisopliae IBCB383, com média de um toco atacado.