A possível glicoproteína dos kitavírus e a indução de morte celular vegetal

Abstract

A leprose dos citros (LC) é uma das principais doenças virais que acometem a citricultura brasileira, com prejuízos recorrentes atribuídos ao citrus leprosis virus C (CiLV-C, Cilevirus leprosis), membro do gênero Cilevirus, família Kitaviridae. Dentre suas linhagens, a estirpe CRD é a mais estudada, servindo como referência para análises funcionais e moleculares. A proteína P61, codificada pela ORF p61 em seu RNA2, é uma possível glicoproteína com funções compatíveis a de uma efetora viral. Sua expressão transiente em Nicotiana benthamiana induz: a) sintomas similares aos de resposta de hipersensibilidade (HR-like), b) estresse do retículo endoplasmático (RE) e c) ativação de resposta a proteínas mal dobradas (UPR), resultando em morte celular programada (PCD), efeitos semelhantes aos observados durante a infecção por CiLV-C. Neste trabalho, análises in silico avaliaram características estruturais de proteínas homólogas à P61 de CiLV-C_CRD codificadas por diferentes kitavírus. Análises bioinformáticas de 13 proteínas homólogas revelaram baixa identidade de sequência entre as proteínas analisadas, mas conservação de características estruturais, como a presença de peptídeo sinal, domínios transmembrana, sítios de N-glicosilação e localização subcelular no RE. Motivos funcionais conservados e modificações pós-traducionais também foram detectados. As variantes da ORF p61 de CiLV-C das estirpes CRD e SJP foram clonadas no vetor binário pCAMBIA 2300 contendo o promotor CaMV 35S e sequência ômega do vírus do mosaico do fumo (tobacco mosaic virus, TMV). A expressão transiente em N. benthamiana revelou que a P61 da estirpe SJP induz sintomas HR-like mais intensos e promove mais precocemente a expressão relativa do gene bZIP60, marcador da via UPR, quando comparada à estirpe CRD. Os resultados demonstram que, apesar da diversidade genômica, as proteínas homólogas à P61 de CiLV-C_CRD compartilham características estruturais conservadas e potencial função ligada à patogênese. Esses achados contribuem para o avanço no entendimento dos mecanismos moleculares da infecção por kitavírus, além de oferecerem subsídios para a identificação de alvos virais conservados passíveis de exploração em estratégias de controle.